植物葉綠素（chlorophyll）含量檢測(cè)試劑盒

植物葉綠素含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
英文名稱(chēng)：Plant chlorophyll content detection kit
關(guān)鍵詞：植物葉綠素|植物葉綠素含量檢測(cè)|葉綠素含量|
貨號(hào)：BC0990
規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說(shuō)明：
植物葉綠素廣泛存在于綠色植物組織中，其含量與光合作用、營(yíng)養(yǎng)狀況密切相關(guān)，是反應(yīng)植物生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。
葉綠素a和葉綠素b在645nm和663nm處有大吸收，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可計(jì)算得葉綠素a和葉綠素b以及總?cè)~綠素含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、10mL玻璃試管，錫箔紙、無(wú)水乙醇、丙tong。

操作步驟：
1. 稱(chēng)取約新鮮植物葉片或其它綠色組織，去掉中脈，稱(chēng)取約0.1g，剪碎，用蒸餾水洗干凈。
2. 提取液的準(zhǔn)備：取200mL無(wú)水乙醇和400mL丙tong，充分混勻待用。
3. 加入1mL蒸餾水，少量試劑一（約10mg），在黑暗或弱光條件下充分研磨，轉(zhuǎn)入10mL玻璃試管。
4. 用提取液沖洗研缽，將所有沖洗液轉(zhuǎn)入玻璃試管，用提取液定容10mL，玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提3h，觀察試管底部組織殘?jiān)?變白則提取*，若組織殘?jiān)?變白，繼續(xù)浸提其*變白。
5. 取浸提液1mL于1mL玻璃比色皿，提取液調(diào)零，測(cè)定663nm和645nm處吸光值，分別記為A663和A645 。

計(jì)算公式：
葉綠素a含量（mg/g）=（12.7×A663 – 2.69 ×A645）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（12.7×A663 – 2.69 ×A645）×D÷m
葉綠素b含量（mg/g）=（22.9×A645 – 4.68 ×A663）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（22.9×A645 – 4.68 ×A663）×D÷m
葉綠素總含量（mg/g）=（20.21×A645 +8.02 ×A663）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（20.21×A645 +8.02 ×A663）×D÷m
V提：提取液體積，10mL；D：稀釋倍數(shù)；m：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)：
1. 葉綠素對(duì)光敏感，研磨和提取等操作盡量避光或者在弱光下進(jìn)行。
2. 一定要浸提組織殘?jiān)?變白，否則提取不充分。
3. 用提取液沖洗研缽一定要沖洗所有的綠色物質(zhì)被轉(zhuǎn)移玻璃試管。
4. 測(cè)定時(shí)吸光值超過(guò)1，可進(jìn)行適當(dāng)稀釋。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影響因子:3.537 PMID:30048775

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