細(xì)胞發(fā)生凋亡時，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞對前向角光散射的能力顯著降低，對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號均降低。因此可通過流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞光散射的變化觀察細(xì)胞凋亡情況。
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測。如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測，則必須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài)，才可以進行檢測。
在使用細(xì)胞凋亡檢測試劑盒應(yīng)注意的事項：
1、樣本處理：根據(jù)試劑盒要求，對細(xì)胞或組織樣本進行適當(dāng)處理，如消化、固定、破膜等。
2、熒光染料選擇：若細(xì)胞本身帶有熒光，需選擇與細(xì)胞自發(fā)熒光不同檢測通道的熒光染料。
3、儀器配置：了解實驗室現(xiàn)有實驗儀器配置，確保能夠準(zhǔn)確檢測熒光信號。
4、對照設(shè)置：設(shè)置適當(dāng)?shù)膶φ諏嶒灒珀幮詫φ蘸完栃詫φ?，以驗證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
