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藍(lán)白斑篩選及其原理介紹
2018-07-30
藍(lán)白斑篩選是重組子篩選的一種方法：是根據(jù)載體的遺傳特征篩選重組子，如α-互補(bǔ)、抗生素基因等?，F(xiàn)在使用的許多載體都帶有一個(gè)大腸桿菌的DNA的短區(qū)段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的調(diào)控序列和前146個(gè)氨基酸的編碼信息。在這個(gè)編碼區(qū)中插入了一個(gè)多克隆位點(diǎn)（MCS），它并不破壞讀框，但可使少數(shù)幾個(gè)氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能，這種載體適用于可編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細(xì)胞。因此，宿主和質(zhì)粒編碼的片段雖都沒(méi)有酶活性，但它們同時(shí)存在時(shí)，可形成具有酶學(xué)活...
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活性氧檢測(cè)試劑盒的操作步驟
2018-07-17
活性氧檢測(cè)試劑盒操作步驟：一、裝載探針：對(duì)于刺激時(shí)間較短（通常為2小時(shí)以內(nèi)）的細(xì)胞，先裝載探針，后用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞。對(duì)于細(xì)胞刺激時(shí)間較長(zhǎng)（通常為6小時(shí)以上）的細(xì)胞，先用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞，后裝載探針。原位裝載探針：本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細(xì)胞。按照1∶1000用無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10μmol/L。去除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入適當(dāng)體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細(xì)胞為宜，通常對(duì)于六孔板的一個(gè)孔加入稀...
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瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液的使用說(shuō)明
2018-07-02
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液可作為多種組織或細(xì)胞的染色使用，不同組織、細(xì)胞，不同的用途可以有不同的使用方法。1、取涂片、自然干燥。2、滴加瑞氏-姬姆薩染液2-3滴覆蓋整個(gè)標(biāo)本涂片，染1-2分鐘。3、滴加等量PH6.4的磷酸鹽緩沖液(或等量超純水)，輕輕晃動(dòng)玻片,與瑞氏-姬姆薩染色液充分混勻，染色3-5分鐘。4、水洗、吸干、鏡檢。5、染色后胞漿和胞核的染色清晰分明，細(xì)胞核著色呈深淺不同的紫紅色，胞漿呈淺紅色，胞漿中顆粒區(qū)分明顯。注意事項(xiàng)：1、涂片厚薄適宜，涂片干透后固定，否則細(xì)胞在染色...
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羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒
2018-07-02
羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒使用說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品說(shuō)明：羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子，造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。H2O2/Fe2+通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，將鄰二氮菲-Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+，導(dǎo)致536nm吸光度下降，樣品對(duì)536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣品清除羥自由基的能力。操作步驟：一、樣品的制備：1.組織：按照...
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細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒的使用方法
2018-06-29
細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒(MDC法)使用說(shuō)明產(chǎn)品說(shuō)明：自噬(autophagy)是細(xì)胞受到刺激后吞噬自身的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞器，終將吞食物在溶酶體內(nèi)降解的過(guò)程，自噬體(autophagosome)為雙層膜包被的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)，內(nèi)含細(xì)胞質(zhì)、長(zhǎng)壽蛋白質(zhì)和異常蛋白聚集物，損傷或多余細(xì)胞器如線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和微體、病毒和細(xì)菌等。單丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC)是一種熒光色素，是嗜酸性染色劑，通常被用于檢測(cè)自噬體形成的特異性標(biāo)記染色劑，其檢測(cè)激發(fā)濾光片波長(zhǎng)355nm...
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ECL Plus超敏發(fā)光液使用方法
2018-06-29
ECLPlus超敏發(fā)光液使用方法：1、常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針?lè)跤?、洗膜。注意用HRP標(biāo)記IgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾心法。核酸雜交膜用HRP標(biāo)記探針雜交，洗膜。2、在洗滌膜上的HRP標(biāo)記二抗的同時(shí)，新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B混合，放置使之恢復(fù)室溫否則會(huì)減弱熒光強(qiáng)度。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有減低。3、用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥。將膜*浸入并與發(fā)光工作液充分接觸（約0.125ml...
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線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒的作用說(shuō)明
2018-06-19
產(chǎn)品作用1、線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒是一種以JC-1為熒光探針，快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。2、通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。3、JC-1是一種檢測(cè)線粒體膜電位的理想熒光探針。在線粒體膜電位較高時(shí)，JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中，形成聚合物，產(chǎn)生紅色熒光；4、在線粒...
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神奇濾布的作用說(shuō)明
2018-06-04
基因工程轉(zhuǎn)化真菌和一些土壤細(xì)菌時(shí)，往往需要先消化掉厚厚的細(xì)胞壁，制備分離原生質(zhì)體以便進(jìn)行轉(zhuǎn)化，即使是大家很熟悉的酵母轉(zhuǎn)化，當(dāng)簡(jiǎn)便的醋酸鋰方法不起作用時(shí)，原始也是有效方法還是原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化。當(dāng)經(jīng)過(guò)消化處理的菌體混合液經(jīng)過(guò)Miracloth過(guò)濾后，就可以去掉未被消化*的菌體和雜質(zhì)，分離得到的“裸露的”原生質(zhì)體就可以準(zhǔn)備進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者電轉(zhuǎn)了。如果沒(méi)有這一步的分離，未*消化的菌體由于生長(zhǎng)迅速，會(huì)嚴(yán)重干擾結(jié)果。植物基因組純化相對(duì)比較麻煩一點(diǎn)，市面上有不少試劑盒可供選擇，多數(shù)純化基因組DNA...
標(biāo)準(zhǔn)品
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