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提取DNA的方法總結(jié)與比較
2025-09-02 dna提取是一項經(jīng)常要做的實驗，下面我們就總結(jié)了四種dna提取方法并做詳細說明和比較。一.濃鹽法提取dna：A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的氯仿一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及氯仿相中間，而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.B.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按氯...
索萊寶試劑盒提取植物dna步驟
2025-09-01 試劑盒提取植物dna已經(jīng)獲得廣泛應用。各個生化試劑廠家也都有了dna提取試劑盒產(chǎn)品。索萊寶作為國內(nèi)生化試劑供應商提供了各類dna提取試劑盒。今天給大家介紹試劑盒提取植物dna步驟。當然是以索萊寶產(chǎn)植物基因組dna提取試劑盒產(chǎn)品為例。使用前先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、植物組織預處理：取新鮮植物組織（不超過100mg）或干重組織（不超過20mg），于液氮中充分研磨至細粉狀，讓液氮自然揮發(fā)。2、將研磨好的植物...
RNAwait(非凍型組織RNA保存液)的作用
2025-09-01 RNAwait是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液，能使細胞內(nèi)的RNA與RNA酶分離，可以快速可靠地保存動物組織、細胞內(nèi)的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中，在室溫可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃標本可以長期保存，RNA穩(wěn)定存在不降解，取出后用各類方法抽提可以獲得高質(zhì)量的RNA。操作流程：1.根據(jù)要保存的各樣本的體積，計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍（如100mg組織約用1mlRNAwait）。2.將RNA...
索萊寶：細胞爬片制備詳細過程
2025-09-01 【爬片的準備】1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用爬片；2.應用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色。3.將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時...
常用細胞固定液及優(yōu)缺點比較
2025-09-01 細胞固定液作用是殺死細胞，固定細胞形態(tài)。下面列舉幾種常用細胞固定液及優(yōu)缺點比較。1.冷丙酮可用于一般的免疫組化染色。將純的丙酮預先放入冰箱-20℃后便為冷丙酮（放心，丙酮在此溫度不會為固體的）細胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很強的揮發(fā)性，注意將含有丙酮和爬片的器皿蓋嚴，防止其揮發(fā)）固定10分鐘。取出后，室溫吹干，然后放入-20℃保存。2.多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光以及TUNEL染色。主要檢測組織內(nèi)一些性能嬌弱的抗原特別...
cck8實驗步驟及注意事項
2025-09-01 CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。下面介紹一下索萊寶cck8實驗步驟及注意事項。一.制作標準曲線（測定細胞具體數(shù)量）1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞到培...
細胞爬片的制備
2025-08-28 細胞爬片又名爬片。細胞爬片就是讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi)，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，冰凍切片，細胞涂片，免疫組織化學，原位雜交等。下面給大家簡單介紹細胞爬片的制備。1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用爬片；2.應用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之...
細胞復蘇的操作步驟及注意事項
2025-08-28 平時研究用的細胞，有需要冷凍保存。冷凍的過程稱為凍存，把凍上的細胞化開的過程叫細胞復蘇。細胞復蘇是一簡單的試驗操作，但操作中有許多需要注意的事項，在實驗操作中注意細小問題，才能使復蘇后的細胞狀態(tài)保持良好。細胞復蘇實驗準備：主要器材：一次性滴管、打火機、酒精燈、大鑷子、中鑷子、記號筆、廢液缸、封口膜、剪子。主要試劑：PBS、培養(yǎng)液、消化酶（胰酶）、75%酒精、雙抗。PBS配制：NaCL:4gKCL:0.1gNa2HPO4:1.745gKH2PO4:0.1g三蒸水：500mL，溶...

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