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高分文獻解讀|磷酸甘油酸脫氫酶通過穩(wěn)定蛋白激酶Cδ型mRNA促進肝細胞癌進展
2025-09-30 基本信息題目：PhosphoglyceratedehydrogenasestabilizesproteinkinaseCdeltatypemRNAtopromotehepatocellularcarcinomaprogression期刊：SignalTransductionａndTargetedTherapyIF:52.7PMID:40681503DOI:10.1038/s41392-025-02304-w通訊作者：汪凱、黃愛龍、唐霓通訊作者單位：重慶醫(yī)科大學文獻背景代謝重編...
索萊寶印度墨水使用方法
2025-09-24 印度墨水使用方法:1.取瓶內(nèi)干粉39.6克，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至充分溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min；冷卻至50℃，搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光，4℃)。2.取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水，搖勻，在36℃培養(yǎng)18h±2h。3.各取10ml上述...
索萊寶新型植物基因組試劑盒操作步驟
2025-09-24 索萊寶植物基因組試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統(tǒng)提取植物的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特別的新型材料，能夠高效、專一吸附DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中其他有機化合物。下面介紹植物基因組試劑盒操作步驟。操作步驟：使用前先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、植物組織預處理：取新鮮植物組織（不超過100mg）或干重組織（不超過20mg），于液氮中充分研磨至細粉狀...
索萊寶紅細胞裂解液使用方法
2025-09-24 紅細胞裂解液是一種去除紅細胞非常簡便易行的方法，然而各廠家的紅細胞裂解液使用方法又不盡相同。下面就以索萊寶所產(chǎn)的紅細胞裂解液為例詳細說明使用方法。紅細胞裂解液是利用細胞內(nèi)外存在鹽離子濃度差而導致細胞膜脹破的原理來裂解無核紅細胞的。紅細胞裂解液經(jīng)無菌處理，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化，淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。紅細胞裂解液使用說明：1.1倍體積的新鮮全血，加入3倍體積的紅細胞裂解液。如1ml新鮮全血加入3ml紅細胞裂解液，輕輕...
蛋白酶k的作用及使用方法
2025-09-24 蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。蛋白酶K的應用比較廣泛。包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH4-12.5)均有活性。蛋白酶K的主要作用：蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機會，提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導...
動物基因組DNA提取方法及步驟介紹
2025-09-24 基因組DNA提取是最常見分子生物學實驗之一。今天給大家介紹的是動物基因組DNA提取。DNA是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學研究的主要對象，為了進行測序、雜交、基因表達、文庫構(gòu)建等實驗，獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提，因此基因組DNA的提取也是分子生物學試驗技術中最重要、最基本的操作之一。動物基因組DNA提取實驗步驟：1、取新鮮或冰凍動物組織塊0.1g（0.5cm3），盡量剪碎。置于玻璃勻漿器中，加入1ml的細胞裂解緩沖液勻漿至不見組織...
胸腺嘧啶核苷的原理及配置方法
2025-09-22 應用：胸腺嘧啶核苷為生化試劑，制備生物培養(yǎng)基，例如HAT選擇性培養(yǎng)基的制備。原理：在單抗制備中，由于需要進行選擇性殺死非目標細胞，所以使用添加HAT的選擇性培養(yǎng)基，其依據(jù)是細胞中的DNA合成有兩條途徑：一條途徑是生物合成途徑（“D途徑”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，為DNA分子的合成提供原料。在此合成過程中，葉酸作為重要的輔酶參與這一過程，而HAT培養(yǎng)液中氨基蝶呤是一種葉酸的拮抗物，可以阻斷DNA合成的“D途徑”。另一條途徑是應急途徑或補救途徑（“S途徑”），它...
簡述TBST緩沖液的配制及應用
2025-09-22 TBST中含有Tris-Hcl，NaCl，Tween20這三種物質(zhì)，是做WESTERNBLOT中常用的一種緩沖液。TBST緩沖液的配制1000ml×TBST的配置先稱量NaCl40g，倒入燒杯中，加DDW蒸餾水400ml,再稱量NaCl47.6g，倒入剛才的那個燒杯中（PS：由于NaCl的量太多，一次稱量不方便，所以分兩次稱量，且易于溶解）。往燒杯中加入Tris—HCl緩沖液100ml，最后加（吐溫20）5ml,轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，在定容，轉(zhuǎn)移即可。TBST緩沖液的應用...

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